E-hepatiidi viirus

E-hepatiidi viirusel (HEV) on sfääriline kuju, läbimõõt 27–34 nm, nukleokapsiidi sümmeetria tüüp on ikosaeedriline, välismembraan puudub.

E-hepatiidi viirus identifitseeriti patsientide väljaheites, kellel oli enteraalse infektsioonitee kaudu mitte-A- ja mitte-B-viirushepatiit, samuti sama viirust sisaldava materjaliga nakatunud katseloomade (ahvide) väljaheites, kasutades immuun-elektronmikroskoopiat (IEM), kasutades selle hepatiidi paranejate seerumit.

Praeguseks on kindlaks tehtud, et E-hepatiidi viirusel on järgmised füüsikalis-keemilised ja bioloogilised omadused.

• Morfoloogiliselt esindavad seda sfäärilised kooreta osakesed; nende pinnal on ogad ja lohud; viirus laguneb kokkupuutel CS CL-iga, külmutamisel/sulatamisel ning säilib temperatuuril -20 °C.
• Viirusosakeste läbimõõt on 32 kuni 34 nm.
• Genoomi esindab 7,5 kb pikkune, üheahelaline, polüadenüleeritud RNA.
• Sedimentatsioonikoefitsient on 183 S (defektsete viiruselaadsete osakeste puhul - 165 S). Ujuvustihedus on KTa/Glu gradiendis ^{1,29 g/cm3.}
• In vitro kultiveerimine ebaõnnestus.
• HEV-osakesi sisaldava väljaheiteekstrakti suspensiooni intratserebraalne manustamine imetavatele hiirtele ei põhjusta neil haigusi.

Molekulaarse kloonimise abil saadi nakatunud makaakide sapist suured kogused HEV-d. Demonstreeriti E-hepatiidi patsientide väljaheidete ekstraktidest saadud viirusosakeste identiteeti maailma eri piirkondades (Somaalia, Borneo, Pakistan, Kesk-Aasia jne). HEV genoomi struktuur dešifreeriti praktiliselt. Nukleotiidjärjestuste ja genoomi organisatsiooni analüüsimise abil tehti kindlaks, et HEV erineb pikornaviirustest ja et see ei saa kuuluda kalitsiviiruste hulka, nagu algselt eeldati.

Genoomi esindab üheahelaline fragmenteerimata positiivne 7500 aluspaari pikkune RNA, mis sisaldab kolme avatud lugemisraami, mis kodeerivad viirusespetsiifilisi valke. Virioni pinnal on tasse meenutavad süvendid (kreeka tupplehed), seetõttu arvati viirus algselt Caliciviridae perekonda (perekond Hepavirus). HEV genoomi üksikasjalikum uuring näitas, et selle RNA nukleotiidjärjestus on ainulaadne ja sarnaneb punetiste viirusega vaid osaliselt.

HEV liigitatakse praegu Hepereviridae sugukonda, Heperevirus perekonda ja E-hepatiidi viiruse hulka.

HEV antigeen(id) - HEV Ag identifitseeriti viirusosakeste pinnal immuun-elektronmikroskoopia abil, hepatotsüütides - immunohistokeemiliste meetoditega. E-hepatiidiga katseloomadel (makaakidel ja šimpansidel) tuvastati HEV Ag hepatotsüütide tsütoplasmas immunofluorestsentsmeetodi abil, kui maksalõike kihistati samadelt loomadelt taastumisperioodil saadud seerumitega; HEV Ag spetsiifilisust kinnitati hiljem absorptsiooniuuringutes, kasutades HEV genoomi kloonimise teel saadud rekombinantseid valke.

E-hepatiidiga nakatunud ahvide immunomorfoloogilistes uuringutes lokaliseeriti HEV Ag granuleeritud ladestusi hepatotsüütide tsütoplasmas, kusjuures HEV Ag-d sisaldavad graanulid paiknesid juhuslikult ja graanulite arv varieerus erinevates rakkudes oluliselt. HEV Ag-positiivsete hepatotsüütide eelistatud lokaliseerimist üheski maksalobuli tsoonis ei tuvastatud. HEV Ag-d sisaldavat hepatiiti tuvastati pidevalt enne ALAT aktiivsuse suurenemist, seejärel püsis see kogu hüperensümeemia perioodi vältel ja kadus praktiliselt pärast ALAT aktiivsuse normaliseerumist.

HEV genoomsed järjestused identifitseeriti inimeste ja katseloomade (ahvide) E-hepatiidiga patsientide väljaheites, sapis ja vereseerumis; humoraalset immuunvastust uuriti haiguse ägedast staadiumist kuni paranemiseni.

HEV-osakeste kõrgeim kontsentratsioon tuvastati nakatunud makaakide sapis enne ALT aktiivsuse haripunkti nakatumise staadiumis, kui registreeriti HEV Ag esinemise haripunkt maksas.

HEV RNA-d on leitud nakatunud inimeste ja primaatide väljaheite-, sapi- ja seerumiproovidest.

Spetsiifiliste antikehade (anti-HEV) olemasolu E-hepatiidiga patsientide ja katseloomade vereseerumis tehti kindlaks immuun-elektronmikroskoopia ja fluorestsents-antikehade meetodi abil, kasutades HEV-osakeste preparaate või substraadina HEV Ag-d sisaldavaid maksalõike.

Edasised läbilõikeuuringud HEV-isolaatide ja paranemisproovides olevate seerumite kohta, mis saadi patsientidelt erinevates geograafilistes piirkondades, kus esines E-hepatiidi puhanguid või juhuslikke juhtumeid, samuti nende isolaatidega nakatunud primaatidelt saadud HEV-osakeste ja seerumite kohta veensid uurijaid lõpuks, et E-hepatiidi eest vastutab üks viirus (või seroloogiliselt seotud viiruste klass) kogu maailmas.

Näidatud on HEV genotüübiline mitmekesisus. Identifitseeriti kaheksa viiruse genotüüpi, mille peamised prototüübid olid järgmised isolaadid: genotüüp 1 - HEV isolaat Birmast, 2 - Mehhikost, 3 - USA-st, 4 - Taiwanist ja Hiinast, 5 - Itaaliast, 6 - Kreekast, 7 - Kreekast (teine isolaat), 8 - Argentinast.

On näidatud, et makaakide ja šimpanside ägedas E-hepatiidi staadiumis ringlevad vereseerumis HEV-vastased klassid IgM ja IgG, samas kui paranemisperioodi seerumis on ainult HEV-vastased klassid.

Mitmetes uuringutes avastati anti-HEV IgM 73%-l E-hepatiidiga patsientidest esimese 26 päeva jooksul pärast kollatõve algust; taastumisperioodil avastati anti-HEV IgG 90%-l patsientidest.

Nakkusallikaks on ainult inimesed, patogeen eritub väljaheitega. Nakatumismehhanism on fekaal-oraalne. Peamine nakatumistee on väljaheitega saastunud vee kaudu. Nakkusdoos on oluliselt suurem kui A-hepatiidi viirusel. HEV-viiruse vastuvõtlikkus on universaalne. Epideemiad võivad mõjutada kümneid tuhandeid inimesi, kui rikutakse joomisrežiimi, eriti hooajatööde ajal suvel ja sügisel.

Kliiniliselt kulgeb E-hepatiit kergemalt kui A-hepatiit ning krooniliseks vormiks üleminekut pole täheldatud. 85–90%-l patsientidest kulgeb E-hepatiit kerge või mõõdukalt, sageli asümptomaatiliselt. Rasedatel naistel kulgeb E-hepatiit aga raskelt, suremus on kuni 20%.

Diagnostikaks kasutatakse immuun-elektronmikroskoopiat; on välja pakutud testsüsteem HEV-antigeenide vastaste antikehade tuvastamiseks. Infektsioonijärgne immuunsus on tugev, eluaegne ja tuleneb viirust neutraliseerivatest antikehadest ja immuunmälurakkudest. Spetsiifilise profülaktika jaoks on välja pakutud täisvirioonivaktsiin ning väljatöötamisel on elus- ja rekombinantvaktsiinid.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]