Geneetiliselt muundatud immuunrakud näitavad potentsiaali ennetada elundi äratõukereaktsiooni

Ajakirjas „Frontiers in Immunology“ esitleti põhimõttelist rakuteraapiat, mis suudab enne elundisiirdamist kõrge immuunsensibilisatsiooniga patsiente „relvituks teha“. Teadlased konstrueerisid regulatoorsed T-rakud (Treg) kimäärse HLA-vastase antikeha retseptoriga (CHAR) – sisuliselt HLA-A2 valgu „söödaga“, mis lülitub Treg-rakkude vastu kokkupuutel HLA-A2-vastaseid antikehi tootvate B-rakkudega. In vitro tundsid need CHAR-Treg-rakud ära ja pärssisid sensibiliseeritud patsientidel kõrge afiinsusega IgG tootmist, säilitades samal ajal Treg-rakkude „identiteedi“ (FOXP3/HELIOS) ja mitte tappes sihtrakke. See annab võimaluse sihipäraseks desensibiliseerimiseks ilma täieliku immunosupressioonita.

Uuringu taust

Transplantoloogias on peamiseks „huvide konfliktiks“ doonori HLA antigeenide vastased antikehad. Pärast vereülekandeid, rasedusi või varasemaid siirdamisi tekib retsipiendil sageli sensibiliseerumine: veres ringlevad juba HLA-vastased IgG ja B-rakkude mälu antikehad, mis on valmis kiiresti „lahtirulluma“. Sellised patsiendid on vähem ühilduvad, ootavad elundi siirdamist kauem ja neil on suurem ägeda ja kroonilise antikehade äratõukereaktsiooni risk. Standardsed desensibiliseerimisprotokollid (plasmaferees/immunoadsorptsioon, IVIG suured annused, rituksimab, proteasoomi inhibiitorid, imlifidaas) toimivad laialdaselt ja umbkaudselt: need vähendavad antikehade või rakkude üldist hulka, kuid ei ole suunatud spetsiifilistele „ohtlikele“ kloonidele ning nendega kaasnevad toksilisuse ja nakkusriskid.

Immuunsüsteemil on oma „pidur“ – regulatiivsed T-rakud (Treg), mis säilitavad tolerantsi „võõra“ suhtes. Viimastel aastatel on Treg-ravist saanud tõeline kliiniline strateegia, kuid „vaikimisi“ versioonis on see mitteselektiivne: süstitud rakud ei tee vahet, millise antigeeni vastu reaktsioon tekib. Seetõttu püüavad teadlased sihtmärki „keerata“ – varustada Treg-rakke kunstlike retseptoritega, mis aktiveeruvad ainult siis, kui nad kohtuvad õige signaaliga. Nii tekkiski kimäärsete retseptorite idee (mis on vaimult sarnased CAR-tehnoloogiatega), kuid mis ei ole kokku pandud anti-CD19, vaid HLA molekulide endi domeenide põhjal, nii et Treg-rakud aktiveeruvad vastavaid anti-HLA antikehi tootvate B-rakkude lähedal.

Selliste "sihitud" Tregide jaoks on kaks olulist nõuet. Esiteks peavad nad jääma tõelisteks Tregideks (säilitama FOXP3/HELIOS-i ja supressorprogramme), ilma et nad tugeva stimulatsiooni taustal efektorfenotüüpi sisse murduksid. Teiseks peab nende toime olema suunatud: täpselt allospetsiifilisi B-kloone ja plasmablaste pärssides, minimaalselt sekkudes ülejäänud immuunsüsteemi, et mitte tõsta infektsioonide ja kasvajariskide ravikulusid. Kui see probleem lahendatakse, ilmneb meetod pehmeks ja täpseks desensibiliseerimiseks enne siirdamist ning täieliku immunosupressiooni vajaduse vähendamiseks pärast siirdamist.

Lõpuks praktiline kontekst: mõnedel patsientidel on sensibiliseerimine suunatud ühele või kahele „problemaatilisele“ alleelile (nt HLA-A2) ja just need blokeerivad juurdepääsu organitele. Sellistele „kitsaskohtadele“ suunatud rakuteraapia võib laiendada sobivate doonorite ringi, kiirendada siirdamist ja vähendada antikehade äratõukereaktsiooni esinemissagedust – eriti lastel ja retsipientidel, kellel on pikaajaline „ajalooline“ kontakt võõra HLA-ga (mitu vereülekannet, korduvat siirdamist). Seetõttu on HLA-vastaste indutseeritud Treg-rakkude põhimõttelise toimivuse tõestamine oluline samm isikupärastatud immunomodulatsiooni suunas transplantoloogias.

Kuidas uus rakk on üles ehitatud

• Ehitus: HLA-A2 rakuväline domeen + hinge-CD8 + transmembraanne CD28 + signaaliülekande "tandem" CD28-CD3ζ. See retseptor aktiveerub, kui B-raku pinnal on HLA-A2-vastane antikeha.
• Spetsiifilisus: CHAR-Treg „käivitub“ spetsiifiliselt anti-A2 B-rakkudel, mõjutamata teisi immuunsussüsteeme.
• Ohutu Tregi profiil: pärast aktiveerimist ei kaota nad joonemarkereid (FOXP3, HELIOS), st nad jäävad „piduriteks“ ega muutu „gaasiks“.
• Mittetsütotoksiline: Erinevalt sama retseptoriga modifitseeritud tavalistest CD4 T-rakkudest ei tapa CHAR-Treg anti-A2 rakke, vaid pärsib nende funktsiooni.

Mida täpselt kontrolliti?

• Ex vivo patsiendimudel: HLA-A2 suhtes sensibiliseeritud patsientide vere mononukleaarseid rakke stimuleeriti stimulatsiooniga (HLA-A2-K562), seejärel lisati CHAR-Treg ning mõõdeti IgG (ELISA) ja B-rakkude koostist (spektraalse voolutsütomeetria, UMAP).
• Tulemus: 48 tunni ja 5 päeva pärast oli IgG tootmine oluliselt vähenenud (2-l 3 patsiendiproovist), B-rakkude osakaal üldiselt vähenes ilma ilmse „valikuta“ alatüüpide (naiivsed, mälu-, marginaaltsooni-, plasmablastid) vahel.
• Autorite tõlgendus: Analüüsi tundlikkust saab suurendada anti-A2-spetsiifilise ELISA ja IgG klasside eraldi hindamise abil; vaja on testida suuremal arvul patsientidel ja teiste HLA alleelide (nt A24) suhtes.

Miks see on siirdamise puhul oluline?

Tänapäeval on 20%-l esmasest ja kuni 75%-l korduvalt vaktsineeritutest juba HLA-vastased antikehad, mis vähendab dramaatiliselt sobivate doonorite ringi ja sunnib vajama suuri immunosupressioonidoose. Mitteselektiivsed desensibiliseerimisprotokollid (plasmaferees, B-rakkude „nullimine“) ei toimi tõrgeteta ja on täis tüsistusi – alates infektsioonidest kuni nefro- ja neurotoksilisuseni (eriti lastel). Sihipärased Treg-rakud, mis toimivad ainult „ohtlike“ B-kloonide vastu, võimaldavad teoreetiliselt laiendada juurdepääsu organitele ja vähendada üldist toksilisust pärast siirdamist.

• Peamised potentsiaalsed eelised:
  • Enne siirdamist: „eemaldage“ sensibiliseerumine konkreetse HLA suhtes ja muutke patsient võrreldavaks sensibiliseerimata patsiendiga.
  • Pärast siirdamist: vähendada baasimmunosupressiooni annuseid ja kroonilise antikehade äratõukereaktsiooni riski.
  • Lisaks siirdamisele: lähenemisviisil on potentsiaalsed rakendused HCV puhul ja isegi raseduse katkemise korral, kui emal tekivad isa HLA-vastased antikehad.

Mida autorid ise ja pressiteated ütlevad

MUSC meeskond (USA) nimetab seda tööd „esimeseks sammuks sihipärase immunosupressiooni suunas: täpselt nende B-rakkude pärssimine, mis ohustavad siirdamist, jättes ülejäänud immuunsüsteemi rahule.“ Pressiteates rõhutatakse potentsiaali vähendada kõrvaltoimeid ja „võrdsustada mänguvälja“ neile, kellel on praegu raske sensibiliseerumise tõttu peaaegu võimatu siirdada.

Kus on piirid ja mis edasi saab?

• See on in vitro/ex vivo põhimõtteline tõestus väikesel arvul patsientide proovidel: kliinikust on veel vara rääkida. Vaja on esimesi inimkatseid, erinevate HLA-de valideerimist ja põhjalikke mehhanismide (sekreteeritavad faktorid, kontaktsõltuv supressioon, CHAR-Treg transkriptoomika) uuringuid.
• Oluline on välja töötada spetsiifilisus ja ohutus: veenduda, et supressioon on rangelt antigeenile suunatud ega häiri teisi immuunsuse harusid.

Mida meeles pidada

• HLA-A2 "söödaga" konstrueeritud Treg-rakud tunnevad ära ja suruvad maha siirdamiseks ohtlikud B-rakud.
• In vitro vähendavad nad sensibiliseerunud patsientidel IgG tootmist ja säilitavad Treg-fenotüübi stabiilsuse ilma tsütotoksilisuseta.
• See on sihipärane alternatiiv mitteselektiivsele desensibiliseerimisele, millel on potentsiaal vähendada immunosupressiooni annuseid ja laiendada juurdepääsu siirdamistele. Järgmine samm on kliinilised uuringud.

Allikas: Valentín-Quiroga J. jt. Kimäärsed HLA-vastase antikeha retseptori abil konstrueeritud inimese regulatoorsed T-rakud pärsivad alloantigeenispetsiifilisi B-rakke eelsensibiliseeritud siirdamisretsipientidelt. Frontiers in Immunology, avaldatud 15. augustil 2025. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385